Протеин А

Протеин A – белок клеточной стенки Staphylococcus aureus, который связывает с большой аффинностью Fc фрагмент молекулы иммуноглобулина различных видов животных. Он представляет собой мономерный белок с массой 42 кДа, содержащий четыре повтора. За счет этого одна молекула протеина А способна связать по крайней мере две молекулы IgG одновременно.

Рекомбинантный протеин А был экспрессирован в клетках E. coli и очищен с помощью аффинной хроматографии до чистоты 95 % или более, что подтверждено электрофоретическим анализом в ПААГ. В процессе очистки не использовались носители с иммобилизованными антителами для предотвращения попадания молекул IgG в конечный продукт.

Применение:

Колонки для аффинной хроматографии с протеином А широко применяются для очистки антител из сывороток крови, асцитов и других биологических жидкостей. Также они используются при производстве рекомбинантных белков, содержащих Fc фрагмент, специально встроенный для возможности аффинной очистки целевого продукта.

Рекомбинантный протеин А связывает большинство подклассов IgG человека и мыши (в том числе IgG1, IgG2, IgG4 человека; IgG2, IgG2a, IgG2b, IgG3 мыши). Он также связывает иммуноглобулины КРС, лошади, свиньи, кролика, морской свинки, хомяка и др.

Рекомбинантный протеин А может использоваться для создания конъюгатов с различными репортерными молекулами (флюоресцентные красители, ферментные метки, биотин, коллоидное золото, радиоактивные метки и т.д.) без влияния на способность связывать антитела. Данные конъюгаты могут быть использованы для детекции антител в таких анализах как Вестерн-Блот, ИФА, иммуногистохимия.