Термостабильная ДНК-лигаза из Thermophilus aquaticus
Taq DNA Ligase – термостабильная NAD+-зависимая ДНК лигаза, полученная из клеток E. coli, несущих плазмиду с соответствующим геном Thermus aquaticus HB8.
Фермент катализирует образование фосфодиэфирной связи в дуплексе ДНК между 5`-фосфатной и 3`-гидроксильной группами, используя NAD+ как кофактор. Для процесса лигирования цепи ДНК либо олигонуклеотиды должны быть хорошо спарены с комплементарной цепью ДНК и не иметь гэпов.
Taq DNA Ligase работает при температуре 45 - 70 °C.
Применение:
- Аллель-специфическое генное типирование с помощью процедур Реакция определения лигазы (LDR) и Лигазной цепной реакции (LCR)
- Мутагенез с помощью включения фосфорилированных олигонуклеотидов во время амплификации через удлинение праймера.
- Сборка Гибсона.
- Высокоточный генный синтез.