MBU T7 endonuclease I

Фермент является мутантной версией белка эндонуклеаза I фага Т7. MBU T7 endonuclease I распознает и расщепляет крестообразные структуры ДНК, структуры Холлидея, неправильно спаренные нуклеотиды, одноцепочечные разрывы в двуцепочечной ДНК (т.н. ник) и т.п.  

Фермент удобно использовать во время работ, связанных с изменением последовательности ДНК. Например, после редактирования генома технологией CRISPR. MBU T7 endonuclease I подходит для поиска делеций, инсерций и несовпадающих нуклеотидов в образцах, полученных после процедуры геномного редактирования.

MBU T7 endonuclease I очищена из штамма E. coli, содержащего плазмиду с клонированным мутированным геном 3 фага Т7.

Области применения:

• Распознавание и расщепление одноцепочечных разрывов ДНК.
• Распознавание и расщепление гетеродуплексов.
• Распознавание и расщепление несовпадениий и внеспиральных петель в двухцепочечной ДНК.
• Неспецифическое разрезание линейной ДНК для «shot-gun» клонирования.

TEV-протеаза

MBU Транспозаза Tn5

Фермент MBU Транспозаза Tn5 – модифицированная версия высокоэффективной гиперактивной транспозазы.

Для проявления ферментативной активности Tn5 должна связаться со специфичной последовательностью ДНК длиной 19 п.о. (мозаичные концы, Mosaic Ends). Последовательность ДНК, заключенная между двумя мозаичными концами, называется транспозон. При инкубации с транспозоном MBU Транспозаза Tn5 в отсутствие ионов Mg ²⁺ образует стабильный комплекс (т.н. транспосома). Транспосома достаточно стабильна, поэтому ее можно использовать для электропорации в живые клетки. Попав в клетку, транспосома активируется внутриклеточным Mg ²⁺ и компонент транспозона случайным образом встраивается в геномную ДНК хозяина. 

При использовании в качестве транспозона синтетических олигонуклеотидов можно осуществлять подготовку NGS-библиотек. На сегодняшний день использование транспозазы Tn5 - это самая быстрая и масштабируемая стратегия получения библиотек для секвенирования.

Урацил-ДНК-гликозилаза

Нуклеаза из Serratia marcescens

Термостабильная ДНК-лигаза из Thermophilus aquaticus

SSB белок

Bst-полимераза

Химически модифицированная Hot Start Tth-полимераза

Химически модифицированная Hot Start Pfu-полимераза (фьюз с SSo доменом)